생명과학 분야는 특별히 실험이 많은 과목이며 실험이 없이는 생명현상의 신비를 규명하기는 불가능합니다. 같은 실험을 하더라도 그 실험을 이해하면서 실행하면 과학자이고, 이해 없이 시키는 대로 하거나 생각 없이 실험을 수행하면 과학자가 아니라 실험조원에 불과합니다. 본 실험서는 생명과학 분야에서 주요 실험과목인 생화학 및 분자생물학 분야 중에서 학부 수준에서의 첨단 실험 내용을 가능한 한 많이 담고, 쉽게 이해할 수 있도록 노력하였습니다.
각 챕터의 앞의 부분에 위치한 Introduction 부분은 학생들이 그 내용을 먼저 이해한 후, 실험을 행할 수 있도록 비교적 자세히 설명하였습니다. 각 챕터는 동영상과 연계되어 Virtual Lab을 구현해 놓아 동영상을 보면서 실험을 구현할 수 있습니다. 또한 챕터 말미에 질문과 참고문헌을 언급하여 보다 심도 있는 학습이 가능합니다.
머리말 0
PART 1 Biochemistry 1
CHAPTER 1 완충용액제조 및 아미노산적정 3
01 pH와 완충용액 4
CHAPTER 2 아미노산과 단백질의 정성, 정량분석 15
01 Methods for Protein Concentration Determination 16
02 아미노산의 분리 및 정성분석 27
CHAPTER 3 단백질의 과발현과 크로마토그래피 37
01 Cell and Protein Harvest 38
02 단백질 과발현과 정제 41
03 Taq polymerase의 정제 51
04 MBP-Taq 친화 크로마토그래피를 이용한 단백질 정제 60
05 크기 배제 크로마토그래피(Size Exclusion Chromatography; 젤 여과 크로마토그래피) 64
CHAPTER 4 효소 활성과 반응속도론 73
01 흡광광도법 74
02 효소반응속도론 81
CHAPTER 5 지방질 추출 및 정성분석 93
01 동물 및 식물 조직으로부터의 지질추출 및 정성분석 94
CHAPTER 6 탄수화물 분리 및 정량 107
01 간 조직으로부터의 탄수화물 분리 및 정성분석 108
CHAPTER 7 SDS-PAGE와 Western Blot 117
01 SDS-PAGE 118
02 Coomassie Blue Staining 127
03 Western Blotting 분석법(Western Blotting Analysis) 131
CHAPTER 8 세포내 단백질 추출물 분리 및 분석 143
01 배양세포의 용액화(Cell Lysate Preparation) 144
02 Reporter Gene Assay/ BCA Assay 151
CHAPTER 9 Peptide FingerPrinting 157
01 Peptide Mass Fingerprinting I 158
02 Peptide Mass FingerPrinting II 169
PART 2 분자생물학 189
CHAPTER 10 Plasmid DNA 조작과 형질전환 191
01 Restriction Enzyme/Agarose Gel Electrophoresis/Ligase 192
02 원형 플라스미드 DNA의 Restriction Mapping 및 Transformation 211
03 Plasmid DNA Preparation 221
04 Midi-Scale Preparation 229
05 Competent 박테리아의 형질전환(Transformation) 효율 측정 241
CHAPTER 11 역전사와 PCR반응 245
01 PCR (Polymerase Chain Reaction) 246
02 Real Time PCR 방법을 이용한 유전자 발현 변화 분석 250
03 PCR을 이용한 돌연변이 유발 255
04 역전사-중합효소 연쇄반응 분석 262
CHAPTER 12 고등동물세포 및 식물세포 Transfection 273
01 Mammalian Cell Culture 274
02 Transfection on Mammalian Cells 279
03 염화칼슘(CaCl2)을 이용한 동물세포의 Transfection 284
04 Liposome을 이용한 동물세포의 Transfection 289
05 PEG (Polyethylene Glycol)를 이용한 원형질 세포의 형질전환 295
CHAPTER 13 진핵세포의 RNA와 Genomic DNA 분리 303
01 단층 배양세포로부터 Genomic DNA의 분리 304
02 쥐의 꼬리 조직으로부터 Genomic DNA의 분리 311
03 식물 Genomic DNA 분리 319
04 TRIzol을 이용한 식물 총(Total) RNA 분리 325
05 TRIzol시약을 이용한 단층 세포에서의 RNA 분리 332
CHAPTER 14 세포분리와 분석 339
01 Cytotoxicity Test (MTT Assay) 340
02 생쥐 비장 면역세포 분리, 염색 및 유세포 분석 344
03 원심분리를 이용한 마우스 혈액 면역세포 분리 352
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